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不同DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响

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【作者】 张敏蔡俊鹏

【Author】 ZHANG Min et al(College of Biosciences and Engineering,South China University of Technology,Guangzhou,Guangdong 510006)

【机构】 华南理工大学生物科学与工程学院华南理工大学轻工与食品学院

【摘要】 [目的]研究不同DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响。[方法]选用3种不同的DNA聚合酶对单一的7株菌进行PCR扩增,通过DGGE图谱分析探讨不同的DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响。[结果]用相同的DNA聚合酶1时,上游引物使用357F1比357F2的效果要好。当357F1作为上游引物时,DNA聚合酶2明显好于DNA聚合酶1,但仍有干扰结果出现;当357F2作为上游引物时,使用DNA聚合酶1和DNA聚合酶2都不能使各菌株分离开来。使用高质量的DNA聚合酶3时,上游引物所加入的无论是40 bp还是只有18 bp的"GC"夹,都能够使不同的DNA片段分离开来。[结论]不同的DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响是很大的,选择合适的DNA聚合酶是至关重要的。

【关键词】 PCR-DGGEDNA聚合酶“GC”夹
【基金】 国家自然科学基金项目(40776091);广东省海洋渔业科技推广专项项目(A200899H02);广东省科技计划-省部产学研项目(2009B090300270)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2011年14期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.14.013
  • 【分类号】Q503
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】400
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