节点文献

小鼠MEF的制备及ES细胞的分离培养试验

免费订阅

【作者】 杨恕玲董雅娟柏学进李建栋程明

【Author】 YANG Shu-ling~1,DONG Ya-juan~1,BAI Xue-jin~1,LI Jian-dong~1,CHENG Ming~1(Animal Embryonic Engineering center,LAC,Qingdao 266109,China;2.The North-west Sci-tech University of Agriculture and Forestry)

【机构】 莱阳农学院动物胚胎工程中心莱阳农学院动物胚胎工程中心 山东青岛266109山东青岛266109西北农林科技大学

【摘要】 本试验采用两种方法制备小鼠胎儿成纤维细胞饲养层(mouse embryon ic fibrob last,MEF),两种方法的差别在于用丝裂霉素-C(m itomyc ine-C,MMC)处理后,一种是用PBS-洗净MMC后直接使用;另一种是丝裂霉素-C处理后,用胰酶消化后重新接种,待细胞融合后再使用。将获得的小鼠胚胎直接接种在MEF上,分别在5~6d后取增殖的ICM团块,消化再接种培养,观察胚胎干细胞(embryon ic stem cell,ES细胞)样集落的生长情况,并对获得的ES细胞样集落进行碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定。结果发现两种处理方法得到的MEF培养体系均具有促进ES细胞增殖以及抑制ES细胞的分化的作用,而且得到的ES细胞样集落符合ES细胞的形态特征,AKP呈强阳性。采用本试验的第一种方法的优点是简化了胎儿成纤维细胞饲养层的制备过程,并且适合做ES细胞的饲养层。

【关键词】 小鼠MEFES细胞分离培养
【基金】 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(03BS129);青岛市科技将才资助
  • 【分类号】R329.2
  • 【被引频次】7
  • 【下载频次】547
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: