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分泌型rhGM-CSF/IL-2融合蛋白表达载体的构建

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【作者】 刘冬梅张卓远王妍孟洪琪

【Author】 LIU Dongmei, ZHANG Zhuoyuan, WANG Yan ( Changchun Institute of Biological Products, Changchun 130062)

【机构】 长春生物制品研究所吉林大学公共卫生学院 长春130062长春130062长春130021

【摘要】 目的 将GM-CSF基因与IL-2基因通过一中间接头G-G-G-S-G-G-S-G连接到一起,并在E.coli中分泌表达具有更高GM-CSF和IL-2生物活性的融合蛋白分子。方法 在引物设计中,通过选择密码子,在Linker的中前部设计了一个BamHI酶切位点,GM-CSF的下游引物和IL-2的上游引物均起始于该位点。然后通过PCR、酶切、连接等一系列分子克隆的方法,构建融合蛋白的克隆及表达载体。结果 经EcoRI/SaII双酶切鉴定,克隆载体pUC19GM-CSF/L/IL-2及表达载体pBVGMCSF/L/IL-2中均插入了正确的外源片段。结论 克隆及表达载体的成功构建,为进一步表达融合蛋白及活性研究打下了基础。

【关键词】 GM-CSFIL-2融合蛋白分泌表达
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2002.04.7.liudm.002
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】85
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