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TRAIL与导向肽融合基因的克隆、表达及其表达产物的生物学活性

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【作者】 侯登勇张英起韩苇赵宁颜真

【Author】 HOU Deng-yong,ZHANG Ying-qi,HAN Wei,et al (Center of Biotechnology,The Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,C hina)

【机构】 第四军医大学生物技术中心第四军医大学生物技术中心 西安710032西安710032西安710032

【摘要】 目的获得具有生物学活性的与导向肽融合表达的重组TRAIL蛋白,提高TRAIL对肿瘤细胞的杀伤作用。方法构建TRAIL与导向多肽PEPHC1的融合基因,克隆入质粒pGEM-3zf(-)中进行测序,序列正确后,亚克隆入表达载体pBV220中,转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达。结果42℃诱导4h,融合基因得到了表达,SDS-PAGE表明目的蛋白占菌体总蛋白的15%以上,以包涵体形式存在。经包涵体洗涤、变性、复性,并经离子交换层析柱纯化后可得到融合蛋白PE-TRAIL,经体外试验证明具有生物学活性。结论成功克隆并表达了具有生物学活性的与导向肽融合表达的重组TRAIL蛋白。

【关键词】 TRAIL导向多肽融合包涵体
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2005.04.9.houdy.002
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】78
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