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人甲状旁腺素N-端34肽基因的合成、克隆和融合表达

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【作者】 文力王革非冷武军王贞慧杨光

【Author】 WEN Li,WANG Ge-fei,LENG Wu-jun,et al (Institute of Life Science,C-bons Research Center,Wuhan 430056,China)

【机构】 丝宝集团科研中心生命科学研究所丝宝集团科研中心生命科学研究所 武汉430056武汉430056武汉430056

【摘要】 目的构建重组人甲状旁腺素N-端34(PTH34)肽的大肠杆菌融合表达菌株,并对其表达产物进行检测。方法选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N-端34肽基因序列,通过6个DNA片段分段合成、片段连接、PCR扩增,经TA克隆到pMD18载体中,经测序验证,构建GST融合表达载体。结果经SDS-PAGE检测PTH(1-34)肽与GST蛋白的融合表达,经Westernblot分析具有免疫活性,通过GST亲和层析和Xa因子酶切,利用小分子蛋白电泳可检测到PTH(1-34)肽。结论已获得了能表达GST-PTH(1-34)融合蛋白的菌株。表达产物具有免疫活性,且能被Xa因子消化得到PTH(1-34)肽。

【关键词】 甲状旁腺素基因合成融合表达
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2005.04.16.wenl.004
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】87
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