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重组人白细胞介素-10在大肠杆菌中的表达及生物学活性分析

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【作者】 井申荣邹全明罗萍洪愉朱永红

【Author】 JING Shen-rong,ZOU Quan-ming,LUO Ping,et al (Department of Clinical Microbiology and Immunology,Faculty of Medical Laborat ory Science,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China)

【机构】 第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室 重庆400038重庆400038重庆400038

【摘要】 目的在大肠杆菌中表达重组人白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10),并检测其生物学活性。方法将IL-10基因重组到质粒pET11c中,转化BL21(DE),提取质粒,经酶切鉴定和测序分析;在25℃用低浓度的IPTG诱导表达,对包涵体IL-10稀释复性;经ELISA检测其含量,MC/9细胞增殖法检测其生物学活性。结果工程菌IL-10/pET11c/BL21诱导表达的目的蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,Westernblot鉴定证实为IL-10蛋白,两种形式的IL-10均具有一定的生物学活性。结论已成功地在大肠杆菌中表达了IL-10,为进一步纯化和制备IL-10的基因工程药物打下了基础。

  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2005.04.20.jingshr.005
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】187
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