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人蛋白C转基因小鼠的建立及乳腺表达

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【作者】 赵宝全章金刚董朝辉贾莉玮沈永才吕茂民姚站馨李伟静孙曼霁

【Author】 ZHAO Bao-quan△,ZHANG Jin-gang,DONG Zhao- hui,et al ( △Institute of Transfusion Medicine,Academy of Military Medic al Science,Beijing 100850,China)

【机构】 军事医学科学院输血研究所军事医学科学院毒物药物研究所军事医学科学院毒物药物研究所 北京100850北京100850北京100850

【摘要】 目的为了获得乳腺定位表达人蛋白C(hPC)的转基因动物。方法采用分步克隆的方法,构建大鼠乳清酸蛋白(WAP)启动子调控的人蛋白C质粒,命名为pWPC。将该质粒系统鉴定后,用PvuⅠ+SmaⅠ双酶切,回收4·6kb的片段(WAP-hPC-PolyA)。通过显微注射技术,将其注入昆明小鼠受精卵雄原核内;共注受精卵810枚,存活640枚,移植给28只假孕母鼠,怀孕的18只母鼠共产仔81只。结果提取鼠尾基因组DNA进行PCR检测,34只阳性,再经Southernblot检测,其中20只整合阳性;将7只整合阳性母鼠传代,产仔7日后收集乳汁,进行ELISA检测,结果均有表达。结论已成功建立了人蛋白C转基因鼠乳腺生物反应器,为hPC乳腺表达研究奠定了基础。

【关键词】 乳清酸蛋白人蛋白C转基因小鼠
【基金】 军事医学科学院创新基金资助项目(020901)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2005.04.23.zhaobq.006
  • 【分类号】R-332
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】120
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