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重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

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【作者】 钟政荣沈继龙汪学龙胡元生沈继录王家传李小月

【Author】 ZHONG Zheng-rong△,SHEN Ji-long,WANG Xue -long,et al ( △Department of Microbiology and Parasitology, Anhui Medic al University,Hefei 230032,China)

【机构】 安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室安徽医科大学第一附属医院检验科安徽省基因研究重点实验室 合肥230032合肥230032合肥230022合肥230032

【摘要】 目的制备重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体(McAb),并检测14-3-3蛋白在人体组织器官的分布。方法将筛选出分泌抗人14-3-3zeta的杂交瘤细胞注射入BALB/c小鼠腹腔,制备腹水McAb,用辛酸-饱和硫酸铵沉淀法纯化,并鉴定其效价、纯度、浓度、特异性以及与天然抗原的亲和力,再用此单抗检测14-3-3蛋白在人体组织器官的分布。结果腹水及纯化后的单克隆抗体的效价分别为1∶107和1∶106。纯化后的纯度达97%,浓度为5mg/ml,能识别天然的人14-3-3蛋白,并能有效地识别兔和鼠脑组织的14-3-3蛋白。在人脑、肾、肺、肝、胃、卵巢、乳腺、结肠、胰腺等组织器官中,均检出14-3-3蛋白。结论已成功制备出重组人14-3-3zeta亚型单克隆抗体,并应用于实际检测,为研究14-3-3蛋白在机体生理和病理情况下的作用机制奠定了基础。

【关键词】 14-3-3蛋白zeta亚型单克隆抗体性质
【基金】 国家自然科学基金(30170841);安徽省自然科学基金(0044547;98436329)资助
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2005.04.48.zhongzhr.015
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】83
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