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狂犬病病毒糖蛋白真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

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【作者】 姚为民舒适周华隋红刘原舒王志武

【Author】 YAO Wei-min,SHU Shi,ZHOU Hua,et al (Changchun Institute of Biological Products,Changchun 130062,China)

【机构】 长春生物制品研究所中国生物技术集团公司 长春130062长春130062北京100029

【摘要】 目的构建狂犬病病毒糖蛋白基因的真核细胞表达载体,并在COS-7细胞中表达。方法培养狂犬病病毒,提取负链RNA,采用RT-PCR的方法扩增糖蛋白基因,并将该基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(A)上,通过脂质体介导的方法,转染COS-7细胞,用ELISA及间接免疫荧光法检测狂犬病病毒糖蛋白在COS-7细胞中的瞬时表达。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(A)/G,转染COS-7细胞后,在其培养上清中未检测到狂犬病病毒糖蛋白的表达。间接免疫荧光试验表明,pcDNA3.1(A)/G能有效地表达狂犬病病毒糖蛋白于转染的COS-7细胞膜上。结论真核细胞表达载体pcDNA3.1(A)/G能够在COS-7细胞中表达狂犬病病毒糖蛋白,为开发狂犬病病毒糖蛋白基因工程疫苗奠定了基础。

【关键词】 狂犬病病毒糖蛋白COS-7细胞真核表达
【所属期刊栏目】 基础研究 (2007年09期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2007.09.29.yaowm.020
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】157
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