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FABP7基因真核表达载体的构建及其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

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【作者】 王毅君车团结张萍闫琨李琳王勤陈卫

【Author】 WANG Yi-jun△,CHE Tuan-jie,ZHANG Ping,et al(△Institute of Biochemistry and Molecular Biology,School of Basic Medical Sciences,Lanzhou University,Lanzhou 730000,China)

【机构】 兰州大学基础医学院生物化学与分子生物学研究所兰州大学生命科学院细胞生物学研究所兰州大学生命科学院生物物理研究所

【摘要】 目的构建脑脂肪酸结合蛋白(BLBP/B-FABP,FABP7)基因的真核表达载体,并检测其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。方法采用逆转录方法从星型细胞瘤组织中扩增FABP7基因,双酶切后插入线性化的pcDNA3.1载体真核启动子下游,构建重组真核表达载体,转染人乳腺癌细胞MCF-7后,采用半定量RT-PCR检测FABP7基因mRNA的表达,MTT法检测细胞的增殖活性、流式细胞术检测细胞的周期变化情况,并对细胞进行计数。结果FABP7基因重组真核表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确,转染MCF-7细胞后48、72和96h,pcDNA3.1-FABP7组的细胞数和细胞的A490值均比pcDNA3.1空质粒组明显降低,G1期细胞百分含量均明显升高。结论已成功构建了FABP7基因的真核表达载体,该载体可抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖。

【所属期刊栏目】 基础研究 (2008年11期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2008.11.38.wangyj.011
  • 【分类号】Q782
  • 【下载频次】74
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