节点文献

Lipocalin-2基因表达产物对人胚肾细胞增殖的影响

免费订阅

【作者】 帖儒修朱道银李娜王爽

【Author】 TIE Ru-xiu,ZHU Dao-yin,LI Na,et al(Department of Immunology,Chongqing University of Medical Sciences,Chongqing 400016,China)

【机构】 重庆医科大学免疫学教研室

【摘要】 目的构建Lipocalin-2(Lcn-2)基因真核表达质粒PL-2,并检测其及前期原核表达的重组Lcn-2蛋白对人胚肾细胞HEK293增殖的影响。方法利用RT-PCR从鼠巨噬细胞RAW264.7中扩增Lcn-2基因,克隆入真核表达质粒pEGFP-C1中,构建重组质粒PL-2。转染HEK293细胞,通过荧光观察和RT-PCR鉴定Lcn-2基因的表达。将重组质粒PL-2和前期原核表达的重组Lcn-2蛋白作用于HEK293细胞,通过MTT法检测细胞增殖情况,Westernblot法检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达。结果重组真核表达质粒PL-2经酶切和测序鉴定,证明构建正确。经荧光观察和RT-PCR鉴定,转染重组质粒PL-2的HEK293细胞中有Lcn-2基因的表达。加入重组Lcn-2蛋白后,HEK293细胞较对照组明显增殖,细胞中PCNA的表达也较对照组明显升高,而重组质粒PL-2对HEK293细胞增殖以及细胞中PCNA的表达均无影响。结论已成功构建了Lcn-2基因真核表达质粒,其对HEK293细胞的增殖无影响,而原核表达的重组Lcn-2蛋白对HEK293细胞的增殖有一定的促进作用,推测Lcn-2基因的表达产物可能通过与细胞膜受体结合促进HEK293细胞的增殖。

【所属期刊栏目】 基础研究 (2008年11期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2008.11.49.tierx.010
  • 【分类号】Q3
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】71
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: