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狂犬病病毒抗原定量检测方法的建立

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【作者】 张国强王远征王晋施彤冯素英

【Author】 ZHANG Guo-qiang,WANG Yuan-zheng,WANG Jin,et al(Beijing Tiantan Biological Products Co.Ltd,Beijing 100024,China)

【机构】 北京天坛生物制品股份有限公司

【摘要】 目的建立狂犬病病毒抗原的定量检测方法,用于疫苗生产过程中病毒含量的监测。方法用狂犬病病毒aG株免疫豚鼠,制备抗狂犬病病毒多克隆抗体,纯化后以辣根过氧化物酶进行标记。采用双抗体夹心ELISA法建立检测系统。以狂犬病疫苗国家参考品为定量标准,建立剂量反应曲线,确定该方法的灵敏度,并对该方法的精密性、特异性和适用性进行验证。结果制备的多克隆抗体高峰效价为1∶105,纯化后的抗血清蛋白含量为6.45mg/ml。建立的ELISA方法对狂犬病病毒抗原的最低检出量为5.3mIU/ml,最佳定量区间为10~110mIU/ml,相关系数为0.9983,精密性和特异性较好。用该方法对狂犬病疫苗进行抗原定量,与NIH法测定的疫苗效力具有一定的相关性;检测市售的不同毒株和细胞系生产的狂犬病疫苗,其结果在2.4~9.9IU/ml之间。结论已建立了狂犬病病毒抗原的定量检测方法,可对来自不同毒株和不同细胞系的狂犬病疫苗进行快速定量检测,为疫苗生产中的质量控制提供了简便的监测手段。

【关键词】 狂犬病病毒抗原定量检测ELISANIH法
【所属期刊栏目】 实验技术 (2008年11期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2008.11.86.zhanggq.017
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】6
  • 【下载频次】275
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