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Y群脑膜炎球菌多糖活化工艺的优化

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【作者】 刘梅影陈敬刘钰李冶珊林海涛张燕斌王平王雪薇焦小玲王义萍

【Author】 LIU Mei-ying,CHEN Jing,LIU Yu,LI Ye-shan,LIN Hai-tao,ZHANG Yan-bin,WANG Ping,WANG Xue-wei,JIAO Xiao-ling,WANG Yi-ping(National Vaccine & Serum Institute,Beijing 100024,China)

【机构】 北京生物制品研究所细菌研究室

【摘要】 目的优化Y群脑膜炎球菌多糖活化工艺,为A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗的研制奠定基础。方法分别以多糖衍化率和游离多糖含量为指标,按照三因素三水平正交试验,以不同的pH值、活化时间和活化剂加量对多糖进行活化后,与破伤风类毒素(TT)偶联,并经Sepharose4FF层析纯化后,对多糖-TT结合物进行各项生化检定、免疫原性检测及稳定性观察,确定最佳活化工艺,并对优化的工艺进行验证。结果以多糖衍化率为指标,可确定pH值和活化剂加量二因素对Y群脑膜炎球菌多糖的活化有显著影响(P<0.05),而以游离多糖为指标时,无法确定三因素对多糖的活化有显著影响(P>0.05),结合各项指标检测及稳定性观察结果 ,确定多糖活化最佳工艺为:在pH12条件下,向每mg多糖中加入等量活化剂,反应10min。采用优化的多糖活化工艺制备3批Y群脑膜炎球菌多糖-TT结合物,各项指标均符合多糖结合疫苗的常规质控标准。结论优化的多糖活化工艺可制备出游离多糖含量低、免疫原性高的Y群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物,结果具有重复性。

【基金】 国家高技术研究发展计划项目(2007AA02Z484)
【所属期刊栏目】 实验技术 (2010年07期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2010.07.95.liumy.016
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】174
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