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快速检测淋球菌porA和16S rRNA基因的环介导等温扩增技术的建立

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【作者】 崔亚利何於娟刘鑫胥文春刘明芳龚艺贺潇

【Author】 CUI Ya-li, HE Yu-juan, LIU Xin, XU Wen-chun, LIU Ming-fang, GONG Yi, HE Xiao(Key Laboratory of Medical Diagnostics, Ministry of Education, Department of Laboratory Medicine, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China)

【机构】 重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室

【摘要】 目的建立快速检测淋球菌porA和16S rRNA基因的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,探讨其用于淋球菌感染早期诊断的可行性。方法利用Primer-ExplorerV3软件分别针对淋球菌porA及16S rRNA基因设计6条引物(2条内引物FIP、BIP,2条外引物F3、B3,2条环引物LF、LB),以淋球菌标准菌株基因组DNA为模板,进行LAMP扩增,同时,以外引物F3、B3为PCR引物,进行PCR扩增,并比较2种扩增方法的灵敏度和特异性。结果LAMP法与PCR法灵敏度相同,可检测到10个拷贝的目的基因;其针对淋球菌porA和16S rRNA基因的引物对脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和大肠埃希菌的DNA均不能扩增。结论已成功建立了检测淋球菌porA和16S rRNA基因的LAMP技术,为淋球菌的快速检测提供了新的手段,有望成为淋球菌常规检测的简便方法。

【基金】 国家自然科学基金资助项目(30700914)
【所属期刊栏目】 实验技术 (2010年10期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2010.10.96.cuiyl.026
  • 【分类号】R378.16
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】178
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