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JTV1基因真核表达质粒的构建及其在K562细胞中的表达

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【作者】 吴燕刘北忠王翀钟梁朱丹王春光金丹婷高艳军黎亮

【Author】 WU Yan,LIU Bei-zhong,WANG Chong,ZHONG Liang,ZHU Dan,WANG Chun-guang,JIN Dan-ting,GAOYan-jun,LI Liang(Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics of Ministry of Education,Faculty of Laboratory Medicine in Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China)

【机构】 重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室

【摘要】 目的 构建JTV1基因真核表达质粒并稳定转染人白血病细胞系K562,检测转染细胞中JTV1基因mRNA和蛋白的表达水平及其对K562细胞增殖的影响。方法从人外周血单个核细胞中克隆JTV1基因,并将其插入pcDNA3.1表达载体中,构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-JTV1,经脂质体介导转染K562细胞,采用RT-PCR和Western blot法鉴定转染细胞中JTV1基因mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测JTV1稳定表达对K562细胞增殖的影响。结果重组表达质粒pcDNA3.1-JTV1经双酶切及测序证实,目的基因已插入质粒中;人JTV1基因能在K562细胞中稳定表达;JTV1具有抑制K562细胞增殖的作用。结论已成功构建了JTV1基因真核表达质粒,并获得了稳定表达人JTV1基因的K562细胞克隆,为进一步研究人JTV1基因的功能及其与白血病细胞增殖及凋亡的相关性提供了细胞模型。

【基金】 国家自然科学基金(30300449);国家中医药管理局(02-03ZP52);重庆医科大学课题(XBYB2007104)
【所属期刊栏目】 基础研究 (2011年01期)
  • 【DOI】10.13200/j.cjb.2011.01.47.wuy.001
  • 【分类号】Q782
  • 【下载频次】118
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