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幽门螺杆菌感应蛋白CrdS的原核表达及生物信息学分析

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【作者】 聂佳莹杨致邦唐磊黄进蒋英

【Author】 NIE Jia-ying;YANG Zhi-bang;TANG Lei;Huang Jin;Jiang Yin;Institute of Neuroscience,Chongqing University of Medical Sciences;

【机构】 重庆医科大学神经科学研究中心重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室

【摘要】 目的原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感应蛋白CrdS,并对其进行生物信息学分析,以探讨其酸适应的调控机制。方法从H.pylori 26695标准株全基因组DNA中PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,插入原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQE30-hp1364,转化大肠埃希菌(E.coli)XL1-blue,IPTG诱导表达重组CrdS蛋白。表达的重组蛋白经Western blot鉴定后,进行生物信息学分析。结果重组表达质粒pQE30-hp1364经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为46 000,表达量占菌体总蛋白的30%,主要以包涵体形式存在,可与Rabbit anti His-Tag Polyclonal Antibody特异性结合;生物信息学分析显示,CrdS的核苷酸序列和氨基酸序列与其他H.pylori菌株(HpG27、F30、B38)具有高度同源性,表面有许多亲水性区域,含多种易被磷酸化的氨基酸。结论成功原核表达了H.pylori CrdS蛋白,并进行了生物信息学分析,为进一步探讨CrdS的感应机制及通过阻断信号感应抗H.pylori感染的途径提供了实验材料。

【所属期刊栏目】 基础研究 (2013年09期)
  • 【DOI】10.13200/j.cnki.cjb.000124
  • 【分类号】R378.99
  • 【下载频次】100
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