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携带低氧诱导因子-1α及角质细胞生长因子的减毒沙门菌TPHK的构建及其在低氧应激大鼠胃肠组织中的表达

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【作者】 白燕青徐倩曾通旭曹荟哲哈小琴

【Author】 BAI Yan-qing;XU Qian;ZENG Tong-xu;CAO Hui-zhe;HA Xiao-qin;Provincial-Level Key Laboratory for Molecular Medicine of Major Diseases and the Prevention and Treatment with Traditional Chinese Medicine Research in Gansu Colleges and Universities, Gansu University of Traditional Chinese Medicine;

【机构】 甘肃中医药大学甘肃重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室兰州军区兰州总医院检验科兰州大学第二临床学院

【摘要】 目的构建携带低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)的减毒沙门菌TPHK,并检测其在低氧应激大鼠胃肠组织中的表达。方法从质粒p IRES-KGF中PCR扩增获得KGF基因片段,经双酶切回收后,与p IRES-HIF质粒进行连接,获得双基因重组质粒p IRES-HIF-KGF,Ca Cl2法转化减毒沙门菌Ty21a,获得重组菌株TPHK。将TPHK菌液灌胃给予大鼠,10~9 cfu/(只·d),饲养7 d后,置模拟海拔6 000 m的高原低氧舱,舱内连续饲养7 d,采集大鼠胃及小肠组织,ELISA法检测HIF-1α及KGF的表达水平。结果重组质粒p IRES-HIF-KGF及重组菌株TPHK经双酶切及测序鉴定证明构建正确。给予TPHK菌液后可明显提高低氧应激大鼠胃及肠组织中HIF-1α及KGF的表达水平(P<0.001)。结论成功构建了携带HIF-1α及KGF的减毒沙门菌TPHK,且其可提高HIF-1α及KGF在低氧应激大鼠胃肠组织中的表达。

【基金】 兰州军区兰州总医院重点课题(2013-1015)
【所属期刊栏目】 基础研究 (2017年02期)
  • 【DOI】10.13200/j.cnki.cjb.001653
  • 【分类号】R57
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】52
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