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一种基于刃天青还原的荧光方法对β-葡萄糖苷酶活性的检测

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【作者】 程鑫张珩马济美

【Author】 CHENG Xin;ZHANG Heng;MA Ji-mei;College of Science,Huazhong Agricultural University;

【通讯作者】 马济美;

【机构】 华中农业大学理学院

【摘要】 建立了一种简单的荧光分析方法实现了对β-葡萄糖苷酶的定量分析检测。其原理是底物2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)在β-葡萄糖苷酶的水解作用下生成抗坏血酸,后者将刃天青还原生成具有强烈荧光的试卤灵,通过溶液荧光强度的变化对β-葡萄糖苷酶活性进行检测。结果发现,抗坏血酸浓度在3~400μmol/L范围内与反应体系在585 nm处的荧光强度呈线性关系,相关系数r~2=0.981。并基于此实现了对β-葡萄糖苷酶活性的定量检测:β-葡萄糖苷酶的浓度在1~30 U/L范围内与溶液在585 nm处的荧光强度呈良好的线性关系,相关系数r~2=0.995,检出限为1.0 U/L。该方法操作简单,反应灵巧,检测范围较宽,可实现对β-葡萄糖苷酶活性的定量分析检测。

【基金】 中央高校基本科研业务费专项资金(26622018JC011);国家自然科学基金资助项目(21402056)
【所属期刊栏目】 实验技术与方法 (2019年03期)
  • 【分类号】O657.3
  • 【下载频次】26
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