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氧化石墨烯基质毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器的性能研究

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【作者】 刘佳董旭郭华王嫚申刚义

【Author】 LIU Jia;DONG Xu;GUO Hua;WANG Man;SHEN Gang-yi;Key Laboratory of Ethnomedicine(Minzu University of China),Ministry of Education,School of Pharmacy,Minzu University of China;

【通讯作者】 申刚义;

【机构】 中央民族大学药学院民族医药教育部重点实验室(中央民族大学)

【摘要】 基于石墨烯优良的物化性能,利用层层组装法将氧化石墨烯修饰于石英毛细管内壁,制备了氧化石墨烯基质的毛细管电色谱,通过电渗流、拉曼光谱等对其进行表征。在此基础上,基于离子键合法将胰蛋白酶固定于毛细管电色谱柱头,制备胰蛋白酶微反应器。两者结合构成毛细管电色谱胰蛋白酶微反应器。实验结果显示,氧化石墨烯作为基质既可提高样品的分离效率,还能促进胰蛋白酶的催化性能。氧化石墨烯修饰的毛细管电色谱对N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)和N-苯甲酰-L-精氨酸(BA)混合物的分离度从裸毛细管的3.70提升至4.71,而其固定化酶活性(米氏常数Km=1.10 mmol/L,最大反应速率Vmax=0.32 mmol·L-1·s-1)也明显优于裸毛细管(Km=109.77 mmol/L,Vmax=0.000 46 mmol·L-1·s-1)。利用所制备的微反应器从10种中药材中筛选胰蛋白酶抑制剂活性成分的药材,结果发现三七和大黄中均存在胰蛋白酶抑制剂活性成分。

【基金】 国家自然科学基金(81573834);民族医药教育部重点实验室(中央民族大学)自主课题(KLEM-ZZ201808);中央民族大学青年学术团队引领计划成果(2019QNYL26)资助
【所属期刊栏目】 实验技术与方法 (2019年06期)
  • 【分类号】O657.7;R284
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