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新型肺结核三抗原组分疫苗的开发和小鼠免疫原性研究

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【作者】 赵燕慧赵辉彭少丹崔海燕李军强苗伟朱涛

【Author】 Zhao Yanhui;Zhao Hui;Peng Shaodan;Cui Haiyan;Li Junqiang;Miao Wei;Zhu Tao;Tianjin University of Science & Technology;Can Sino Biologics Inc.;

【机构】 天津科技大学康希诺生物股份公司

【摘要】 目的构建高效表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)ESAT6、rv3407、Rpf B三个显性抗原基因(3 antigens,3Ag)的重组人5型腺病毒(Adenovirus 5,Ad5)载体疫苗,在小鼠模型中初步完成药效学研究。方法用Ad EasyTMXL腺病毒载体系统构建重组质粒p Ad5-3Ag,经Pac I线性化后转染AD293细胞获得表达3Ag融合蛋白的Ad5-TPA-3Ag;采用Western blot检测腺病毒载体中融合蛋白的表达;将纯化的病毒颗粒以肌肉注射和滴鼻两种方式免疫小鼠,采用ELISA检测血清中抗体效价,对病毒的免疫剂量进行优化。结果含3Ag基因的重组腺病毒载体构建成功。包装的病毒Ad5-TPA-3Ag以8×107IFU的剂量免疫小鼠42d时各抗原的效价最高,ESAT6肌肉注射和滴鼻的最高效价分别为4.54和4.87;rv3407肌肉注射和滴鼻的最高效价分别为3.41和3.60;Rpf B肌肉注射和滴鼻的最高效价为3.63和2.42。结论 Ad5-TPA-3Ag在小鼠模型中可以诱导良好的免疫应答,可能成为一种新型的针对MTB潜伏感染的候选疫苗。

【关键词】 结核分枝杆菌ESAT6rv3407RpfB人5型腺病毒
【基金】 国家重大新药创制(2015ZX09J15105);艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治(2016ZX10004001)
【所属期刊栏目】 论著 (2018年02期)
  • 【分类号】R392
  • 【下载频次】50
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