节点文献

杭菊CHI基因的克隆及原核表达

免费订阅

【作者】 王蕊邹庆军郭巧生汪涛程搏幸

【Author】 WANG Rui;ZOU Qing-jun;GUO Qiao-sheng;WANG Tao;CHENG Bo-xing;Institute of Chinese Medicinal Materials,Nanjing Agricultural University;

【通讯作者】 郭巧生;

【机构】 南京农业大学中药材研究所

【摘要】 从杭菊转录组数据库中筛选并通过PCR技术成功克隆得到3条杭菊査尔酮异构酶基因(Cm CHI)分别命名为:CmCHI1,Cm CHI2,Cm CHI3。生物信息学分析表明:Cm CHI1~3开放阅读框的碱基数分别为708,633,681 bp分别编码235,210,226个氨基酸。利用原核表达技术成功诱导得到3条30 k Da左右的融合蛋白,同时使用Ni-NTA树脂柱分离纯化得到相应的重组融合蛋白。聚类分析表明,筛选得到的3条Cm CHI与菊科植物同源性较高,Cm CHI1与Cm CHI3属于Ⅰ型CHI; Cm CHI2属于Ⅳ型CHI。以β-actin为内参基因,使用RT-qPCR检测并分析Cm CHI1~3基因在杭菊中的表达量差异,结果表明Cm CHI1,Cm CHI3表达量较高,Cm CHI2表达量较低;淹水处理能显著促进Cm CHI1,Cm CHI3基因的表达,而对Cm CHI2无调控作用,由此得出CmCHI1,Cm CHI3是主要参与杭菊黄酮类化合物合成的查尔酮异构酶基因,Cm CHI2为辅助基因。以上研究结果为进一步研究CHI基因在杭菊黄酮类化合物代谢中的分子调控机制提供依据,从而为提高杭菊黄酮含量及最终提高杭菊药用品质奠定基础。

【基金】 国家自然科学基金青年基金项目(81503180);中央高校基本科研业务费专项资金项目(KJQN201643,KYZ201608)
【所属期刊栏目】 分子生药学 (2019年14期)
  • 【DOI】10.19540/j.cnki.cjcmm.20190325.102
  • 【分类号】S567.239
  • 【下载频次】152
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: