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参附益心颗粒对缺氧诱导的大鼠H9C2心肌细胞能量代谢的影响

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【作者】 崔琳王幼平王新陆李彬郝轩轩谢世阳高原王小晓王贺朱明军

【Author】 CUI Lin;WANG Youping;WANG Xinlu;LI Bin;HAO Xuanxuan;XIE Shiyang;GAO Yuan;WANG Xiaoxiao;WANG HE;ZHU Mingjun;First Affiliated Hospital,Henan University of Chinese Medicine;First Clinical College of Henan University of Chinese Medicine;

【通讯作者】 朱明军;

【机构】 河南中医药大学第一附属医院河南中医药大学第一临床医学院

【摘要】 目的探讨参附益心颗粒治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法以不同浓度(0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 9、1. 2 mg/ml)的参附益心颗粒处理H9C2细胞24 h,MTT法检测细胞活性,筛选后续实验的药物浓度。将H9C2细胞分为正常组(正常培养)、模型组(缺氧6 h)、曲美他嗪组(1×10-4mol/L曲美他嗪+缺氧6 h)、辅酶Q10组(1×10-4mol/L辅酶Q10+缺氧6 h)及中药低剂量组(0. 25 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h)、中药高剂量组(0. 5 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h),检测各组心肌细胞ATP含量、底物代谢酶脂肪酸转运酶(FAT)、肉碱脂酰转移酶1 (MCPT-1)、中链脂酰辅酶A脱氢酶(MCAD)、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、葡萄糖转运子4 (GLUT-4)、腺苷酸转运体(ANT)、肌酸激酶(CK)蛋白表达水平;观察各组H9C2心肌细胞超微结构的变化。将H9C2细胞分为正常组、模型组、中药组(0. 5 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6 h),JC-1染色检测线粒体膜电位变化。结果 0. 5 mg/ml参附益心组及低于此浓度组无细胞毒性,以0. 5 mg/ml参附益心颗粒用于中药组。与正常组比较,模型组H9C2细胞ATP含量及FAT、MCPT-1、MCAD、GLUT-4、ANT、CK蛋白含量明显降低,AMPK、PDH蛋白含量明显升高(P <0. 05)。与模型组比较,中药组和辅酶Q10组心肌细胞中ATP含量及FAT、MCPT-1、MCAD、GLUT-4、ANT、CK蛋白含量均明显升高(P <0. 05)。正常组细胞线粒体结构正常,模型组细胞膜破裂,线粒体肿胀,边界模糊不清。与模型组对比,中药组细胞损伤明显减轻,细胞膜完整,线粒体结构清晰。JC-1染色显示中药组可以改善线粒体膜电位的下降。结论参附益心颗粒可能通过升高心肌H9C2细胞ATP、GLUT-4、ANT、FAT、MCPT-1、MCAD、CK蛋白表达,降低AMPK、PDH蛋白表达,改善缺氧诱导H9C2心肌细胞线粒体膜电位,从而发挥治疗慢性心力衰竭的作用。

【基金】 自然科学基金(81703897,81603466,81373853)
【所属期刊栏目】 实验研究 (2019年10期)
  • 【DOI】10.13288/j.11-2166/r.2019.10.013
  • 【分类号】R285.5
  • 【下载频次】82
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