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苯并[a]芘对人支气管上皮细胞CYP1A1、GSTP1和GSTM1 DNA甲基化水平和mRNA表达的影响

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【作者】 刘爱香李新曹晶晶李欢张志红梁瑞峰郝忠锁张红梅

【Author】 LIU Ai-xiang;LI Xin;CAO Jing-jing;LI Huan;ZHANG Zhi-hong;LIANG Rui-feng;HAO Zhong-suo;ZHANG Hong-mei;Department of Environmental Health, School of Public Health, Shanxi Medical University;Department of Radiological Health, Center for Disease Control and Prevention,Taiyuan Iron & Steel Company;

【机构】 山西医科大学公共卫生学院环境卫生教研室太钢疾病预防控制中心放射卫生科

【摘要】 [目的]探讨苯并[a]芘(BaP)对人支气管上皮(16HBE)细胞中CYP1A1、GSTP1和GSTM1启动子区DNA甲基化水平和mRNA表达的影响,为BaP毒理学机制的研究提供科学基础。[方法]体外培养16HBE细胞,取对数生长期的同一批次细胞,随机分为4组,包括1个溶剂对照组和3个BaP处理组,分别用二甲基亚砜(DMSO)及1、2、5 mmol/L BaP处理24 h,于倒置显微镜下观察细胞的形态学改变。采用CCK-8试剂盒测定细胞增殖能力,甲基化特异性PCR法检测CYP1A1、GSTP1和GSTM1启动子区DNA甲基化水平,实时定量PCR技术检测CYP1A1、GSTP1和GSTM1 mRNA表达的改变。采用SPSS 22.0软件的单因素方差分析进行比较,LSD法进行多组间的两两比较。[结果]与溶剂对照组相比,1、2、5 mmol/L BaP处理组新生细胞数目明显增多,细胞增殖率增高,分别为(100.00±0.47)%、(125.22±0.72)%、(122.92±1.47)%、(128.44±5.97)%(P<0.05)。3个BaP组CYP1A1启动子区甲基化水平分别为8.451±1.234、8.532±0.728、11.064±0.423,低于溶剂对照组(13.917±1.094)(P<0.05)。3个BaP处理组GSTP1启动子区甲基化水平分别为4.276±0.839、3.691±0.748、2.121±0.336,也低于溶剂对照组(10.860±1.129)(P<0.05)。GSTM1启动子区甲基化水平分别为34.693±6.603、48.407±7.824、49.803±2.516;其中,1 mmol/L BaP组低于溶剂对照组(40.062±7.746),2、5 mmol/L BaP组高于溶剂对照组(均P<0.05)。3个BaP组CYP1A1 mRNA表达水平分别为0.009±0.001、0.009±0.001、0.017±0.003,低于溶剂对照组(1.067±0.064)(P<0.05);GSTP1 mRNA和GSTM1 mRNA的表达水平分别为(0.179±0.074、0.167±0.048、0.143±0.029)和(0.547±0.181、0.518±0.141、0.297±0.044),均低于溶剂对照组(0.829±0.116、0.975±0.183)(P<0.05)。[结论]BaP对16HBE的毒作用机制可能与其细胞增殖能力增强及CYP1A1和GSTP1启动子区DNA甲基化水平降低,CYP1A1、GSTP1、GSTM1 mRNA表达降低有关。

【基金】 太原钢铁集团卫生处资助项目(编号:2014);山西省高等学校科技创新项目和哲学社会科学研究项目(编号:2016155);山西省研究生联合培养基地人才培养项目(编号:2017JD24);山西省回国留学人员科研资助项目(编号:2017-059)
【所属期刊栏目】 专栏:苯并a芘的毒性效应 (2018年04期)
  • 【DOI】10.13213/j.cnki.jeom.2018.17680
  • 【分类号】R114
  • 【下载频次】37
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