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影响电转化效率的几个因素探讨

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【作者】 包其郁孙永巧王慧峰包静月徐微徐祖元杨焕明

【Author】 BAO Qi yu *,SUN Yong qiao,WANG Hui feng,et al. * Beijing Genomics Institute/Genomics and Bioinformatics center,Chinese Academy of Sciences,Beijing 101300

【机构】 北京华大基因研究中心/中国科学院基因组信息学中心北京华大基因研究中心/中国科学院基因组信息学中心 北京101300中国科学院遗传和发育研究所人类基因组中心北京100101温州医学院浙江温州325027北京101300北京101300北京100101

【摘要】 目的 :探讨大规模DNA测序技术平台中影响电转化效率的几个因素。方法 :电转化法测定经稀释或乙醇沉淀处理后连接反应混合物的转化效率。结果 :电转化电压在 2 .1~ 2 .5kV之间可获得高转化效率 ;乙醇沉淀法虽能降低盐浓度 ,但同时使微量质粒DNA丢失 ,不能提高电转化效率 ;稀释法能提高转化效率 5倍左右 ;连接反应物转化时 ,感受态细胞悬浮于无菌去离子水中的转化效率比悬浮于 10 %甘油无菌去离子水中的高。结论 :降低连接反应混合物的盐浓度能有效提高电转化效率 ,在大规模DNA测序技术平台中 ,急需研究开发一种纯化回收微量质粒DNA的简单而有效的方法

【关键词】 电转化转化效率乙醇沉淀法稀释法
  • 【DOI】10.13771/j.cnki.33-1386/r.2003.01.005
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】29
  • 【下载频次】1002
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