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印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响

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【作者】 高自然赵郭盛彭动斌吕杨帆郭乔楠

【Author】 GAO Ziran;ZHAO Guosheng;PENG Dongbin;LYU Yangfan;GUO Qiaonan;Department of Pathology,Second Affiliated Hospital,Army Medical University (Third Military Medical University);Department of Orthopedics,the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University;

【机构】 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院病理科重庆医科大学第一附属医院骨科

【摘要】 目的通过体内外实验观察印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响。方法利用慢病毒建立稳定过表达TSSC3的骨肉瘤MTH细胞株,收集骨肉瘤细胞上清制备条件培养基(conditional medium,CM);通过划痕实验、Transwell实验及小管形成实验观察CM对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的迁移和小管形成能力的影响;RT-PCR、Western blot及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨肉瘤细胞中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)mRNA及蛋白水平变化;建立裸鼠移植瘤模型,免疫组化检测肿瘤组织中VEGFA蛋白及微血管密度(microvessel density,MVD)的表达情况。结果过表达TSSC3(over TSSC3)组CM抑制内皮细胞迁移和小管形成,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR、Western blot及ELISA检测结果显示,overTSSC3组细胞较对照组VEGFA mRNA和蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);裸鼠移植瘤免疫组化检测结果显示,overTSSC3组肿瘤中VEGFA蛋白表达量及MVD明显低于对照组。结论印记基因TSSC3可能通过下调VEGFA的表达进而抑制骨肉瘤血管生成。

【基金】 国家自然科学基金面上项目(81602591);重庆市基础科学与前沿技术研究重点项目(CSTC2015jcyjBX0067)~~
【所属期刊栏目】 基础医学 (2018年10期)
  • 【DOI】10.16016/j.1000-5404.201801125
  • 【分类号】R738.1
  • 【下载频次】60
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