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沉默REV7联合奥沙利铂诱导人结肠癌细胞THC 8307凋亡的研究

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【作者】 王蒙蒙李昕马璐李元杰隋御马会明徐方

【Author】 WANG Mengmeng;LI Xin;MA Lu;LI Yuanjie;SUI Yu;MA Huiming;XU Fang;Ningxia Medical University,Department of Cell Biologyand Medical Genetics,Key Laboratory of Fertility Preservation and Maintenance,Ministry of Education/Key Laboratory of Reproduction in Ningxia;

【机构】 宁夏医科大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学系生育力保持教育部重点实验室/宁夏生殖与遗传重点实验室

【摘要】 目的探讨抗肿瘤药物奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)联合沉默REV7基因对人结肠癌细胞THC8307细胞凋亡的影响。方法体外培养人结肠癌细胞株THC8307,将REV7基因的特异性siRNA片段转染THC8307细胞,运用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot法检测转染后细胞中REV7 mRNA和蛋白表达;运用MTT方法确定L-OHP对THC8307细胞的半数抑制浓度,实验分为不作任何处理的THC8307组、加药处理的L-OHP组,药物联合REV7 siRNA处理的L-OHP+REV7 siRNA组,采用细胞免疫荧光法检测THC8307细胞Bax、BCL-2的表达定位;采用流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率;Western blot法检测各组细胞Bax、BCL-2蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,流式细胞术结果显示L-OHP、L-OHP联合REV7 siRNA组均能促进THC8307细胞凋亡,Western blot结果显示,L-OHP、L-OHP联合REV7 siRNA可明显下调凋亡因子BCL-2、上调Bax的蛋白表达水平、BCL-2/Bax灰度比值显著性下降(P<0.05),同时L-OHP、L-OHP联合REV7 siRNA两组相比较,后者较单独L-OHP组对THC8307细胞促进凋亡作用更加显著(P均<0.05)。结论 L-OHP联合沉默REV7基因可显著性地诱导人结肠癌细胞THC8307凋亡,发挥抗肿瘤作用。

【关键词】 结肠癌细胞奥沙利铂REV7细胞凋亡
【基金】 国家自然科学基金(31360082)
【所属期刊栏目】 论著 (2017年02期)
  • 【DOI】10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2017.02.002
  • 【分类号】R394.6
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