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Let-7f对人结肠癌细胞上皮间转换及侵袭能力的影响

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【作者】 苗雨尹华张旭郭丹张飞雄阮继刚

【Author】 MIAO Yu;YIN Hua;ZHANG Xu;GUO Dan;ZHANG Feixiong;RUAN Jigang;Department of Digestive Internal Medicine,General Hospital of Ningxia Medical University;Ningxia Medical University;

【通讯作者】 阮继刚;

【机构】 宁夏医科大学总医院心脑血管病医院消化内科宁夏医科大学

【摘要】 目的探讨Let-7f在结肠癌组织和结肠癌细胞株中的表达,分析上调Let-7f对人结肠癌细胞上皮间质转换(epithelial-mesenchymal Transition,EMT)和迁移侵袭能力的影响。方法采用qRT-PCR检测Let-7f在结肠癌组织与癌旁组织中的表达,并检测Let-7f在结肠癌细胞系(HT29、loVo、SW480、SW620)和人正常结肠上皮细胞(NCM460)中的表达;采用基因转染技术将Let-7f模拟物转染人结肠癌细胞株HT29,qRT-PCR验证转染效率;Western blot检测转染前、后结肠癌细胞中EMT相关分子标志物E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达变化;采用划痕愈合实验、Transwell小室法分别检测转染后的HT29细胞的迁移和侵袭能力变化。结果 qRT-PCR结果显示,Let-7f在结肠癌组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.01);同时,Let-7f在结肠癌细胞系(HT29、loVo、SW480和SW620)中的表达量均低于人正常结肠上皮细胞系(NCM460)(P均<0.01)。转染Let-7f mimic 48h后,qRT-PCR检测转染效率显示:与阴性对照组(NC组)相比,Let-7f mimic转染组Let-7f表达水平升高(P<0.01)。Western blot结果显示,Let-7f mimic转染组细胞中E-cadherin表达水平高于NC组(P<0.05),而N-cadherin和vimentin表达水平低于NC组(P<0.05)。划痕愈合实验显示:Let-7f mimic转染组细胞划痕愈合率低于NC组(P<0.05)。Transwell小室法显示,Let-7f mimic转染组穿过小室的细胞数少于NC组(P<0.05)。结论 Let-7f可抑制人结肠癌细胞上皮-间质转化、迁移侵袭能力。

【关键词】 Let-7f上皮间质转化结肠癌细胞侵袭转移
【基金】 国家自然科学基金(8146037);宁夏自然科学基金(NZ13143;NZ15141);宁夏医科大学校级项目(XQ2012008)
【所属期刊栏目】 论著 (2018年12期)
  • 【DOI】10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2018.12.001
  • 【分类号】R735.35
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