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鹿茸组织中内参基因的筛选和验证

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【作者】 张然然刘华淼邢秀梅胡大勇

【Author】 ZHANG Ran-ran;LIU Hua-miao;XING Xiu-mei;HU Da-yong;State Key Laboratory of Special Economic Animal Molecular Biology,Institute of Special Wild Economic Animal and Plant Science,Chinese Academy of Agricultural Sciences;Jilin Province Baicheng City Animal Health Supervision;

【机构】 中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物重点实验室白城市动物卫生监督所

【摘要】 为筛选在不同生长时期鹿茸组织中稳定表达的内参基因,试验以不同生长时期(分别为脱盘后10、20、40和60d)的鹿茸组织为材料,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、β2-微球蛋白(B2M)、还原型辅酶Ⅰ(NADH)、60S核糖体蛋白L40(RPL40)、谷胱甘肽还原酶7(GPx)和β肌动蛋白(ACTB)6个看家基因的表达情况,并运用geNorm和NormFinder两个程序综合分析6个看家基因的表达稳定性。结果显示,GAPDH、ACTB、RPL40表达稳定性较好,可用作鹿茸基因表达研究的内参基因,而NADH和GPx的稳定性最差,不适合作内参基因。通过对鹿茸生长相关基因(ANXA5、HSP27、PRD2、CRABP1、LGALS1)表达分析,进一步验证了上述结果,并且发现这5种基因均在脱盘后10d的鹿茸组织中高表达。该研究结果为鹿茸快速生长及骨化相关基因的研究奠定了一定基础。

【关键词】 qRT-PCR鹿茸内参基因geNormNormFinder
【基金】 特种动物遗传资源创新团队(CAAS-ASTIP-201X-ISAPS);吉林省科技攻关计划(20140204058NY)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2015年04期)
  • 【DOI】10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.04.017
  • 【分类号】S825
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】106
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