网络首发时间:2018-04-12 08:54:21

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DacD过量表达对大肠杆菌胞外蛋白生产的影响

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【作者】 卢潇杨海泉沈微许菲

【机构】 江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室

【摘要】 大肠杆菌(Escherichia coli)是广泛用于重组蛋白表达的宿主之一。但E.coli缺乏高效的蛋白胞外分泌机制,研究如何提高E.coli胞外蛋白生产水平具有重要意义。研究中分析了D,D-羧肽酶Dac D过量表达对E.coli胞外蛋白生产水平的影响。结果表明:与对照株相比,过量表达Dac D时重组E.coli BL21(DE3)的重组绿色荧光蛋白(GFP)的胞外生产水平提高了1.6倍。同时,当过量表达Dac D时,E.coli BL21的重组淀粉酶胞外生产水平较对照株提高了2.6倍。进一步研究发现,Dac D的过量表达可促进E.coli BL21细胞内可溶性肽聚糖的积累。过量表达Dac D也增强了E.coli BL21细胞内膜的通透性。Dac D过量表达导致了E.coli BL21细胞形态的变化,重组菌株细胞两端形成了透明的球状囊泡结构。因此,通过过量Dac D提高E.coli胞外蛋白生产水平是可行的,结果可为促进E.coli蛋白胞外生产提供了新的研究思路。(图8表2参35)

【基金】 国家自然科学基金项目(21406089);江苏省自然科学基金(BK20140152);江南大学研究生教育教学研究与实践课题(YJSJG2017004)
  • 【DOI】10.19675/j.cnki.1006-687x.2017.10029
  • 【分类号】Q78
  • 【下载频次】32

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