网络首发时间:2018-04-13 15:36:22

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适用于流式细胞术的三角褐指藻核DNA染色方法

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【作者】 张志霞高莉刘倩倩曹素娟兰利琼卿人韦

【机构】 四川大学生命科学学院

【摘要】 为制备可用于配置有488 nm激发器的流式细胞仪检测核DNA含量的三角褐指藻细胞,取对数生长期的三角褐指藻细胞,分别采用70%乙醇、1%戊二醛、1%甲醛溶液进行细胞固定,经RNase A消化后的样品用PI染色,用SYBR-green I对未经RNase A消化的细胞染色,在荧光显微镜下观察细胞染色情况,用流式细胞仪检测细胞核DNA含量。结果显示:在荧光显微镜下观察到,三种不同固定液固定的细胞均表现为SYBR-green I只对藻细胞核染色,PI对于藻的细胞核与细胞质均有着色。流式结果的DNA直方图显示,SYBR-green I染色的细胞的DNA直方图有明显的G1与G2/M峰,拟合度(RCS)在3左右,变异系数(%CV)在8.6左右。而PI染色细胞的DNA直方图表现为变异系数值偏大,拟合度较低,没有明显的G1与G2/M峰。因此,SYBR-green I是一种无需对细胞进行RNase A处理,可应用于配置有488 nm激光器流式细胞仪的核酸染料。(图5表2参25)

【基金】 国家自然科学基金(40976092);四川省科技厅项目(2014JY0171)
  • 【DOI】10.19675/j.cnki.1006-687x.2018.01013
  • 【分类号】Q94-33
  • 【下载频次】44

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