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乙酰肝素酶在头颈鳞癌组织中的表达及其反义寡核苷酸对喉癌细胞侵袭力抑制的研究

马建刚

河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科

摘要:目的探讨乙酰肝素酶(heparanase,HPSE)在人类头颈鳞癌组织中的表达与临床病理特征及预后的关系及其反义寡核苷酸对喉癌Hep-2细胞侵袭力抑制作用。方法对62例头颈肿瘤手术切除标本进行检测,采用免疫组化技术检测HPSE在原发肿瘤组织及其淋巴结转移灶中的表达,同时采用计算机图像分析的方法检测正常黏膜、无转移组原发肿瘤细胞及转移组原发肿瘤细胞的平均光密度,分析其表达同患者的年龄、临床分期、病理分级、淋巴结有无转移及与预后的关系;设计合成互补于HPSE mRNA起始密码区的HPSE AS-ODN,以阳离子脂质体Lipofectin包埋后转染人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞进行培养,采用流式细胞分析技术和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Hep-2细胞HPSE蛋白及其mRNA表达的变化;在此基础上以Matrigel细胞侵袭试验分别对HPSE反义寡核苷酸对Hep-2细胞侵袭力的抑制进行检测。结果HPSE的表达与病人的年龄、肿瘤的病理分级无显著相关性(P>0.05),而与头颈部肿瘤有无淋巴结转移以及肿瘤的临床分期显著相关(P<0.05);HPSE在原发灶及其淋巴结转移灶中的表达之间呈明显正相关(r=0.9162,P =0.001);HPSE的表达和肿瘤的TNM临床分期分别为影响预后的独立因素,二者分别与患者的预后显著相关(P<0.05);反义寡核苷酸各组分别与正常对照组和脂质体对照组比较及反义寡核苷酸各组间比较HPSEmRNA和HPSE蛋白的表达及细胞侵袭力均有明显抑制作用,差异有统计学意义(P<0.01);反义寡核苷酸在终浓度为100nmol/L、200nmol/L和400nmol/L时对hep-2细胞侵袭力的抑制率分别为60.1%、80.8%and 94.0%。结论HPSE的表达与头颈鳞癌有无淋巴结转移、肿瘤的临床分期密切相关; HPSE的表达、肿瘤的临床分期是影响头颈鳞癌病人的预后的独立因素;HPSE反义寡脱氧核苷酸通过下调HPSEmRNA和HPSE蛋白的表达可显著抑制人喉癌hep-2细胞的侵袭力,并呈剂量依赖性。
会议名称:

第五届中国肿瘤学术大会暨第七届海峡两岸肿瘤学术会议、国际肿瘤细胞与基因治疗学会会议、第二届中日肿瘤介入治疗学术会议

会议时间:

2008-09-19

会议地点:

中国河北石家庄

  • 专辑:

    医药卫生科技

  • 专题:

    肿瘤学; 眼科与耳鼻咽喉科

  • 分类号:

    R739.91;R739.6

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