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马铃薯反义SSU原核表达载体的构建及其对大肠杆菌糖原合成的影响

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【作者】 万巧凤姚新灵丁海麦

【Author】 WAN Qiao-feng et al(Higher Vocational School of Ningxia Medical College,Yinchuan,Ningxia 750021)

【机构】 宁夏医学院高职学院宁夏大学生命科学学院包头医学院基础部 宁夏银川750021宁夏银川750021内蒙古包头014010

【摘要】 [目的]为了鉴定马铃薯反义SSU的功能。[方法]利用分子生物学技术,构建了马铃薯反义SSUcDNA原核表达载体(pE-aS),通过0.1mol/LIPTG诱导pE-aS在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,测定糖原的相对含量。[结果]经连接、转化和酶切鉴定筛选出重组表达载体pE-aS,而pE-aS转化BL21(DE3)获得重组菌株BL21-aS。经IPTG诱导的BL21-aS糖原含量OD值为0.409,显著低于对照菌株BL21(DE3)和未经IPTG诱导的BL21-aS,而对照菌株BL21(DE3)和未经IPTG诱导的BL21-aS的糖原含量OD值差异不显著。这表明反义SSU在BL21内表达能够抑制glgC编码的AGPase的形成,从而减少其糖原合成量。[结论]该研究为构建马铃薯反义SSU植物转化载体奠定了基础。

【关键词】 AGPase原核表达载体糖原植物转化载体
【基金】 国家自然科学基金项目(30160010);教育部科学研究重点研究课题;宁夏自然科学研究基金项目(C132)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2007年36期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2007.36.070
  • 【分类号】S532;Q943.2
  • 【下载频次】117
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