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编码结构域Tt APuX25基因片段的分离与克隆

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【作者】 谢晚彬谢和芳

【Author】 XIE Wan-Bin et al(College of Chemistry and Bioengineering,Yichun University,Yichun,Jiangxi 336000)

【机构】 宜春学院化学与生物工程学院西南大学荣昌校区 江西宜春336000重庆402460

【摘要】 [目的]将Tt apux25基因片段克隆到表达载体pET21a(t)中。[方法]以热产硫化氢高温厌氧杆菌菌液为模板,根据编码结构域Tt APuX25的基因片段Tt apux25设计1对特异引物进行PCR扩增。将Tt apux25克隆到表达载体pET21a(+)中,筛选阳性克隆并对其进行测序鉴定。[结果]通过PCR扩增获得一个250~500bp的扩增片段。对获得的阳性克隆进行筛选和测序鉴定,发现所得阳性克隆为表达载体pET21a(+)中插入有序列正确的Tt apux25片段。阳性克隆中的重组质粒被命名为pEX25,并将其转化进表达宿主菌大肠杆菌Tuner感受态细胞中。[结论]该方法直接将Tt apux25基因片段克隆到表达载体pET21a(+)中,操作简便并取得了较好的效果。

【基金】 重庆市自然科学基金项目;宜春学院校级科研课题
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2007年36期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2007.36.035
  • 【分类号】Q943.2
  • 【下载频次】26
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