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石榴RAPD反应体系优化及亲缘关系研究

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【作者】 刘素霞洪达高武军邓传良卢龙斗

【Author】 LIU Su-xia et al(Henan Normal University,Xinxiang,Henan 453007)

【机构】 河南师范大学河南师范大学 河南新乡453007河南新乡453007

【摘要】 利用正交试验设计,从Mg2+、dNTP、引物、酶4种因素3个水平上对石榴RAPD反应体系进行优化,确立了适合石榴RAPD反应体系:在25μl反应体系中,含1×PCRbuffer、2.5mmol/LMgCl2、200μmol/LdNTP、0.2μmol/L引物、50ng模板DNA、0.5UTaq DNA聚合酶。通过梯度PCR测验,确定了适宜的退火温度37℃。利用优化的RAPD反应体系对11个石榴品种进行亲缘关系分析,结果表明,11个品种之间的多态性比较高,变异大。聚类图结果表明,11个品种被明显分为临选1号、净皮甜、新大甜、临选14号;大粒三白甜、大青皮酸、小红皮酸、白花、江石榴、薄皮糙、玉石籽两个类群。因此,这一优化体系适合于石榴品种间的亲缘关系鉴定。

【关键词】 石榴RAPD正交设计梯度PCR
【基金】 河南省自然科学基金项目(0611030300)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2007年36期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2007.36.094
  • 【分类号】S665.4
  • 【被引频次】11
  • 【下载频次】147
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