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农杆菌介导的中华补血草遗传转化体系的建立

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【作者】 李维焕张霞张慧赵彦修

【Author】 LI Wei-huan et al (College of Life Science,Shandong Normal University,Jinan,Shandong 250014)

【机构】 山东师范大学生命科学学院山东师范大学生命科学学院 山东济南250014山东济南250014

【摘要】 [目的]为利用转基因技术培育中华补血草新品种奠定基础。[方法]对农杆菌介导的中华补血草转化体系中的各种影响因素进行了系统研究,以构建中华补血草的遗传转化体系。[结果]中华补血草叶片对卡那霉素敏感,以50 mg/L卡那霉素作为补血草叶片转化受体较为适宜。400 mg/L特美汀能有效抑制农杆菌,而500 mg/L头孢曲松钠则不能。菌株EHA105对中华补血草的转化率达15%,远高于菌株LBA4404和GV3101。对于侵染中华补血草无菌苗叶片的重悬菌液,以OD600为0.7~1.0为宜。4 d共培养的效果较好,15.6%外植体可分化成芽。PCR检测结果表明30株卡那霉素抗性植株均为阳性,而阴性对照未扩增到条带,表明NPTⅡ外源基因已整合到受体植物基因组中。[结论]影响中华补血草转化率的关键因素是农杆菌菌株的选择。

【关键词】 中华补血草农杆菌遗传转化影响因子PCR
【基金】 国家重点基础研究发展“973”计划(2006CB100100)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年07期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.07.059
  • 【分类号】S567.239
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】124
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