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玉米SSR分子标记技术操作规程的优化

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【作者】 王伟杨文鹏关琦张文龙戴保威

【Author】 WANG Wei et al(College of Agronomy,Guizhou University,Guiyang,Guizhou 550025)

【机构】 贵州大学农学院贵州省农业生物技术重点实验室贵州省种子总站贵州大学农学院 贵州贵阳550025贵州贵阳550006贵州省旱粮研究所贵州贵阳550025贵州贵阳550001

【摘要】 [目的]建立玉米SSR标记技术操作规程,为其在生产中应用提供参考。[方法]以2个玉米杂交种(黔单16号、西山99)和4个玉米自交系(苏37、交51、黄C、4011)为试材,从玉米中提取基因组DNA,分别对不同DNA提取方法、SSR反应体系、PCR扩增程序和银染方法进行比较。[结果]采用SDS法、CTAB法提取DNA的扩增效果较好。玉米的最佳SSR反应体系为:1U Taq酶,1×Bufer,60ng模板DNA,2.0 mmol/LMg2+,0.15 mmol/LdNTPs,0.3μmol/L引物。最佳SSR扩增程序为:93℃,1 min;93℃,1 min;60℃,2 min;72℃,2 min,30个循环;72℃,5 min。用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶或6%变性聚丙烯酰胺凝胶来检测玉米SSR标记较好。[结论]采用优化的SSR标记检测体系,对贵州51份玉米杂交种进行遗传多样性分析,大多数引物扩出清晰条带。

【关键词】 玉米SSR技术规程优化
【基金】 贵州省科技计划项目(黔科合NY字[2005]3021)资助
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年11期)
  • 【分类号】S513
  • 【被引频次】29
  • 【下载频次】585
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