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甘蔗ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建

董伟清王爱勤韦波何龙飞杨丽涛李杨瑞

广西大学农学院植物科学系广西壮族自治区药用植物园广西农业科学院作物改良与生物技术重点开放实验室 广西南宁530005广西南宁530005广西农业科学院作物改良与生物技术重点开放实验室广西南宁530007广西南宁530023

摘要:[目的]为甘蔗的基因工程育种提供理论基础和技术储备。[方法]从甘蔗嫩叶中提取总RNA,根据GenBank中甘蔗ACC氧化酶cDNA序列设计2对引物,利用RT-PCR技术扩增甘蔗ACO cDNA序列。构建甘蔗ACO cDNA正义植物表达载体和反义植物表达载体,并利用含ACC氧化酶基因的植物重组表达载体转化根癌农杆菌感受态细胞。[结果]从甘蔗嫩叶中提取总RNA的OD260/OD280为1.90,说明提取RNA完整性好、纯度高,完全可满足cDNA逆转录的要求。所获得的甘蔗ACC氧化酶cDNA序列全长为969bp,与GenBank中甘蔗ACOcDNA的核苷酸序列同源性为98.6%,氨基酸序列同源性为97.5%。成功构建了正义植物表达载体pBIaco和反义植物表达载体pBIantiaco,并将其导入根癌农杆菌EHA105中。[结论]该研究为研究该基因的功能和培育甘蔗转基因新种质资源奠定了基础。
  • 专辑:

    农业; 理工A(数学物理力学天地生)

  • 专题:

    生物学; 农作物

  • 分类号:

    S566.1;Q943.2

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