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应用RACE法分离和克隆猪GPX2基因研究

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【作者】 赵华周继昌李俊刚赵莹王康宁

【Author】 ZHAO Hua et al(The Center of Future Agriculture for Human Health,Sichuan Agriculture University,Ya′an,Sichuan 625014)

【机构】 四川农业大学未来农业与人类健康研究中心四川农业大学动物营养研究所

【摘要】 [目的]运用分子生物学技术克隆猪GPX2基因。[方法]以猪十二指肠总RNA为模板,根据人、大鼠、小鼠、牛、狗GPX2基因同源序列分析,设计兼并引物对,采用RT-PCR技术扩增获得了1段330bp的猪GPX2基因序列。根据获得的已知序列分别设计引物,采用3-′RACE和5-′RACE技术手段分离、克隆猪GPX2基因。并对所得基因进行基因序列分析。[结果]该试验成功克隆分离了1段长924 bp的mRNA序列,该序列包含完整3′-末端,与人、鼠、牛、狗GPX2基因具有较高的序列同源性,并在基因第114~116位置具有编码硒代半胱氨酸残基(Sec)的密码子TGA。[结论]序列分析比对的结果表明克隆的基因就是猪GPX2基因(NCBI GeneBank数据库序列号为DQ98982)。

【关键词】 基因克隆GPX2RACERT-PCR
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年18期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.18.109
  • 【分类号】S828
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】235
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