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农杆菌介导外源基因转化棉花上胚轴方法的研究

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【作者】 阳立恒郝秀英曲延英

【Author】 YANG Li-heng et al (College of Agronomy,Xinjiang Agricultural University,Urumuqi,Xinjiang 830052)

【机构】 新疆农业大学农学院新疆农业科学院微生物应用研究所

【摘要】 [目的]介绍一种获得棉花转基因植株的新方法。[方法]以棉花感受态萌动的上胚轴作为外源基因转化的受体,用农杆菌介导法将携带有筛选标记NPTII(新霉素磷酸转移酶)基因及GFP(绿色荧光蛋白)报告基因导入棉花,研究了农杆菌介导法用于棉花感受态萌动上胚轴转化的预培养时间,浸菌时间,共培养时间及抗生素处理浓度等。[结果]在新疆棉花离体培养植株直接再生植株基础上,经3~5d预培养处理过的棉花上胚轴,在浸菌15 min共培养2 d后,经50 mg/L kan筛选,用1 000 mg/L头孢霉素抑菌,并用相对高含量细胞分裂素和低含量生长素的组合对其进行直接出芽培养,从而获得抗性小苗。[结论]用农杆菌转化处理棉花上胚轴是一种操作简单、重复性好、非基因依赖型的转化方法。

【基金】 新疆农业科学院院长基金项目(2007Y09)资助
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年19期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.19.073
  • 【分类号】S562
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】185
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