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尾叶桉U6 4CL基因cDNA克隆及反义表达载体的构建

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【作者】 孔华郭安平郭运玲刘恩平贺立卡

【Author】 KONG Hua et al (Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Haikou,Hainan 571101)

【机构】 中国热带农业科学院热带生物技术研究所

【摘要】 [目的]为了获得桉树4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)基因,构建植物反义表达载体,研究4CL基因对木质素的调控机理。[方法]从尾叶桉U6幼茎组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到1.4 kb cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy。[结果]测序结果表明,该基因1413 bp,编码471个氨基酸。克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pBI121上,构建成4CL反义基因表达载体。通过冻融法将携带反义cDNA的植物表达载体质粒导转入根癌农杆菌EHA105,得到完整的Ti质粒表达载体系统。[结论]为该基因转化桉树的主栽品种尾叶桉U6以降低其木质素含量奠定了基础。

【关键词】 尾叶桉4CL基因反义表达载体
【基金】 国家自然科学基金(30700515);海南省自然科学基金(80668)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年20期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.20.134
  • 【分类号】S792.39
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】164
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