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重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的纯化及部分酶学性质研究

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【作者】 谢焱顾国贤李崎

【Author】 XIE Yan et al(Key Laboratory of Industrial Biotechnology,Ministry of Education,Jiangnan University,Wuxi,Jiangsu 214122)

【机构】 江南大学工业生物技术教育部重点实验室

【摘要】 [目的]研究重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的性质。[方法]由重组大肠杆菌制备重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶发酵液,经乙醇分级沉淀和DEAE-650M离子交换层析分离纯化后进行SDS-PAGE纯度鉴定,最后分析纯化后重组酶的酶学性质。[结果]SDS-PAGE分析表明纯化后得到了较纯的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶,比活力达13 437 U/mg,纯化倍数为19.85倍,回收率为20.60%,分子量约30 kDa。纯化后重组酶的最适pH值为6.0,pH值4.5~6.0较稳定;最适温度为50℃,40~50℃较稳定;Cu2+和Fe2+对其活力有显著的抑制作用,Mg2+、Zn2+和Mn2+对其活力有抑制作用,比较适合在啤酒酿造上使用。[结论]该研究为重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的工业化应用奠定了基础。

【基金】 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2006AA020204)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年20期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.20.008
  • 【分类号】Q789
  • 【被引频次】9
  • 【下载频次】185
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