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K88菌毛基因的克隆及ST表位序列在菌毛基因上的融合

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【作者】 胡建军陈创夫祝建波

【Author】 HU Jian-jun et al (Key Laboratory of Agricultual Biotechnonogy,Shihezi University,Shihezi,Xinjiang 832003)

【机构】 石河子大学农业生物技术重点实验室石河子大学动物科技学院

【摘要】 [目的]为了建立用于细胞表面展示的载体系统。[方法]利用PCR技术,以大肠杆菌质粒为模板扩增K88菌毛操纵子的结构基因faeC~faeH,并克隆到pBR322质粒载体中。合成一段替换序列,在菌毛抗原基因的超变区引入酶切位点ApaI和NcoI,合成耐热肠度素STII表位编码序列,并引入菌毛抗原基因的超变区。[结果]经PCR鉴定和限制性内切酶酶切证明,重组质粒pBR-fae插入片断大小为6.6kb,与预期相符。核苷酸序列分析证明,所得faeC~faeH序列正确。PCR筛选和测序验证证明,构建了K88菌毛-耐热肠度素STII的融合基因。[结论]试验成功获得了重组质粒pBR-fae-ST。

【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年21期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.21.133
  • 【分类号】S852.5
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】66
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