节点文献

白木香基因组DNA的提取及ISSR反应条件的优化

免费订阅

【作者】 贾文杰李恩香杨柏云刘东晓

【Author】 JIA Wen-jie et al (College of Life Science,Nanchang University,Nanchang,Jiangxi 330031)

【机构】 南昌大学生命科学学院东莞市莞香园艺科技有限公司

【摘要】 [目的]以白木香为试验材料,研究基因组DNA提取方法,并优化ISSR-PCR反应体系。[方法]利用快速提取仪和微量液氮法提取DNA,并对ISSR-PCR反应体系进行单因素筛选。[结果]微量液氮法提取的DNA质量好于快速提取仪,但2种方法得到的DNA对后续ISSR研究没有明显的差异。同时,建立了最适的白木香ISSR-PCR体系,即25lμPCR反应体积中,1×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl2,4ng/μl模板DNA,200μmol/L dNTPs,1.1 UTaqDNA聚合酶,0.4μmol/L引物。最佳扩增程序为:94℃预变性5 min,然后进行45个循环,94℃变性45 s,复性温度根据各引物的TM值略低1~2℃,45 s,72℃延伸75 s,循环结束后72℃延伸7 min。[结论]优化系统的建立为进一步利用ISSR分子标记技术进行白木香遗传多样性研究提供了基础。

【关键词】 白木香DNA提取ISSR分子标记
【基金】 广东省东莞市中小企业创新基金项目
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年24期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.24.069
  • 【分类号】S567.19
  • 【被引频次】18
  • 【下载频次】220
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: