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一种简捷有效的大肠杆菌感受态细胞制备方法

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【作者】 代红星张庆桥樊宝良

【Author】 DAI Hong-xing et al(College of Animal Science and Technology,Hebei Agricultural University,Baoding,Hebei 071000)

【机构】 河北农业大学动物科技学院河北工程大学农学院

【摘要】 [目的]探索建立简捷快速有效的大肠杆菌感受态细胞制备方法。[方法]在已有的TSS法基础上进行了进一步的改进,建立了一个只需一步室温离心便能够获得与常规方法效价相近,能够长期保存的大肠杆菌感受态细胞的制备方法。[结果]新方法制备的感受态细胞每微克转化菌落数达105~106个,可以满足在质粒中进行的常规克隆需要。不同冻存时间对新方法制备的感受态细胞转化效率无显著影响。新方法制备的感受态细胞可以立即使用也可以于-80℃下长期保存至少9个月不会影响其转化效价。这也与常规CaC l2法制备的感受态细胞性能相当。[结论]该方法为一次大量制备并长期保存使用感受态细胞奠定了基础。

【关键词】 大肠杆菌感受态细胞CaCl2法制备
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2008年29期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.29.047
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】11
  • 【下载频次】2107
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