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重金属镉螯合物人工抗原的合成与鉴定

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【作者】 张云显刘发央杨慧赵丽李鹏李霞

【Author】 ZHANG Yun-xian et al (Gansu Agricultural University,Lanzhou,Gansu 730070)

【机构】 甘肃农业大学北京市农林科学院蔬菜研究中心内蒙古农业大学动物科学与医学学院

【摘要】 [目的]合成并鉴定重金属镉螯合物抗原。[方法]以乙二胺四乙酸(EDTA)或二乙烯三胺五乙酸(DTPA)为双功能螯合剂,合成了半抗原,并将半抗原与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)或卵清蛋白(OVA)偶联制备完全抗原,对其进行浓度测定、紫外分光光度计扫描、SDS-PAGE电泳定性鉴定和石墨炉原子吸收光谱法检测。[结果]利用二喹啉甲酸(BCA)法检测分离纯化后的的Cd-DTPA-OVA、Cd-EDTA-KLH、DTPA-OVA和EDTA-KLH中蛋白的实际浓度依次为1.862±0.038、5.121±0.024、25.155±0.014和8.459±0.018mg/m l,紫外扫描和电泳鉴定证明,抗原合成成功;用吸收光谱法检测的上述抗原中的镉离子含量依次为34.6±0.3、96.5±0.5、0和0μg/m l,表明半抗原确实偶联到蛋白质上,进一步证明抗原合成成功。[结论]该研究为重金属螯合物单克隆抗体的制备和建立快速检测方法奠定基础。

【关键词】 双功能螯合剂抗原合成鉴定
【基金】 国家863专项(2007AA10Z439);国家自然科学基金项目(30671205)
【所属期刊栏目】 农业基础科学与方法 (2009年14期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.14.026
  • 【分类号】TS207.51
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】265
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