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口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因的表达及反应原性鉴定

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【作者】 孙靖向华靳野蔡建平王贵平尚佑军宣华刘湘涛

【Author】 SUN Jing et al(National Reference Laboratory of Foot-and-Mouth Disease,Key Laboratory of Animal Virology of Agricultural Ministry,State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology,Lanzhou Veterinary Institute,China Academy of Agricultural Science,Lanzhou,Gansu 730046)

【机构】 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室吉林大学畜牧兽医学院广东省农业科学院兽医研究所

【摘要】 [目的]研究口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因的表达及反应原性鉴定。[方法]以含有FMDV 3ABC基因的质粒为模板,应用RT-PCR技术扩增口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因并进行序列测定,将3AB基因克隆至表达载体pET-28a(+),选取阳性克隆转化BL21感受态用IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE鉴定与W estern-bolt检测分析。[结果]经SDS-PAGE和W estern-bolt分析表明,在大肠杆菌中成功表达了3AB蛋白,表达的目的蛋白能与FMDV阳性血清发生特异性反应。[结论]该项研究为应用以重组FMDV非结构蛋白为抗原建立感染和免疫动物的鉴别诊断方法提供了依据。

【关键词】 FMDV非结构蛋白表达反应原性
【基金】 国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD06A17);广东省科技攻关项目(2005A20902002);广东省社会发展计划项目(2006B20801002)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2009年14期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.14.129
  • 【分类号】S852.5
  • 【下载频次】109
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