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矮牵牛花特异表达启动子PchsA的克隆及蓝色基因F3′5′H表达载体的构建

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【作者】 李吉莲姚宁涛祝建波邓福军

【Author】 LI Ji-lian et al(Key Laboratory of Agriculture Biotechnology,College of Life Science,Shihezi University,Shihezi,Xinjiang 832003)

【机构】 石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室新疆农垦科学院棉花所

【摘要】 [目的]克隆花特异表达启动子PchsA,将此启动子与蓝色基因"F3′5′H"构建新的表达载体,拟以该启动子驱动"F3′5′H"在其他花色中特异表达。[方法]根据GenBank报道的矮牵牛启动子的序列设计并合成一对特异引物,以蓝紫色矮牵牛总DNA为模板,用PCR仪扩增目的片段。[结果]PCR扩增出的启动子DNA片段长约550 bp,回收后连接到PGM-T质粒载体上,经转化、筛选确定重组子,酶切鉴定后送上海生工生物工程公司测序,得到片段长度为553 bp。经DNAMAN软件分析和GenBank上BLAST序列比对,显示序列与已报道序列同源性为98.55%。应用pcgene软件进行序列分析,结果表明试验克隆的启动子含有启动子所必须的所有调控元件,这与报道的序列基本一致。[结论]试验成功地克隆了CHSA启动子并将其与"F3′5′H"构建成能够在植物中进行遗传转化的表达载体,为培育新型花色新品种奠定了基础。

【基金】 新疆生产建设兵团重大科技攻关项目(2006GG20);新疆生产建设兵团科技攻关项目(2006GG03);兵团博士资金“转基因棉花杂交棉育种技术新体系的建立”项目
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2009年17期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.17.122
  • 【分类号】S188;S681.9
  • 【被引频次】10
  • 【下载频次】335
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