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金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶与谷胱甘肽S-转移酶GST在大肠杆菌中的高效融合表达

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【作者】 任文彬张世清黄俊生

【Author】 REN Wen-bin et al (Environment and Plant Protection Institute,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Danzhou,Hainan 571101)

【机构】 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所仲恺农业工程学院

【摘要】 使用RT-PCR方法,从高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliaeHN1中,克隆得到一个全长为1 275 bp的几丁质酶基因,经Blast分析此基因序列与M.anisopliaeE6的chi1基因(AF02749)同源率为96%。将此基因克隆到pGEX-6p-1载体上,使之与载体上一个约26kD大小的谷胱甘肽S-转移酶(GST)相连,构建pGEX-chi融合表达载体,转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL 21中,经SDS-PAGE结果分析显示:表达出的融合蛋白大小为68 kD,此目的蛋白占表达总量的64.5%。经破碎处理后可检测到几丁质酶活性。

【基金】 国家科技支撑计划(2007BAD48B00)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2009年17期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.17.077
  • 【分类号】S476
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】140
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