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摘要:[目的]探索基于AFLP的拮抗链霉菌DNA模板制备方法及其扩增体系,为AFLP技术在链霉菌乃至放线菌资源分析中的应用提供依据。[方法]以改进的CTAB法提取DNA,利用PstⅠ/MseⅠ型AFLP试剂盒及其反应体系进行扩增,采用5%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析扩增结果。[结果]提取了10个拮抗链霉菌菌株的基因组DNA,0.8%琼脂糖凝胶电泳检测显示其主带清晰,片段大小为37.64~40.86 Kb,无降解现象,亦无RNA残留;其OD260/OD280为1.625~1.833;PstⅠ/MseⅠ双酶切产物琼脂糖电泳呈弥散荧光长带,说明酶解充分;筛选出的3对引物对DNA模板的扩增谱带清晰,多态性丰富。[结论]该研究建立的DNA模板制备方法及其扩增反应体系可用于链霉菌的AFLP分析。
  • DOI:

    10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.18.067

  • 专辑:

    农业科技

  • 专题:

    植物保护

  • 分类号:

    S476

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