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农杆菌介导紫花苜蓿子叶遗传转化的影响因素研究

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【作者】 曲静王丕武杨金慧

【Author】 QU Jing et al(Biotechnology Center of Jilin Agricultural University,Changchun,Jilin 130118)

【机构】 吉林农业大学生物技术中心

【摘要】 以5~7 d的紫花苜蓿无菌苗为材料进行卡那霉素抗性筛选,用RG-2质粒(含VP7基因和卡那霉素抗性基因)和农杆菌(EHA101、EHA105)构建重组质粒,对无菌苗和重组质粒进行共培养,研究菌株类型、菌液浓度对转化效率的影响。结果表明,菌株EHA105对紫花苜蓿的转化率达4%,重悬菌液的OD600以0.3~0.5为宜,农杆菌侵染时间以10~12 m in较好;PCR检测结果表明,37株卡那霉素抗性植株中30株为阳性,说明VP7外源基因已整合到受体植物基因组中。

【关键词】 农杆菌紫花苜蓿遗传转化
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2009年22期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.22.083
  • 【分类号】S541.9
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】131
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